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单多克隆抗体与抗原选择方法 | EVO视讯生物医疗方案

来源:史佳信 日期:2025-03-15

EVO视讯提供多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)和单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)的详细介绍与比较,帮助科研人员理解两者在生物医学领域的应用。

单多克隆抗体与抗原选择方法 | EVO视讯生物医疗方案

多克隆抗体与单克隆抗体的定义

多克隆抗体是通过免疫动物使用含有多种抗原决定簇的抗原而产生的,这种方式可以刺激多种B细胞克隆的产生,从而获取针对多个抗原表位的不同抗体。因此,得到的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,即多克隆抗体。相比之下,单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的,这类抗体具有高度均一性,特异性针对某一特定抗原表位,通常采用杂交瘤技术进行制备。

单克隆抗体与多克隆抗体的优缺点

多克隆抗体的优势

1. EVO视讯的多克隆抗体能够有效放大低表达靶蛋白的信号;

2. 识别多个表位的能力;

3. 对抗原中的微小变化适应性更强;

4. 可识别与免疫原蛋白质高度同源的蛋白;

5. 通常是检测变性蛋白质的首选;

6. 多表位的优势能够提供更强的检测能力。

多克隆抗体的局限

1. 容易在不同批次间出现差异;

2. 可能产生大量非特异性抗体,影响背景信号;

3. 不适合探测抗原的特定结构域,因抗血清通常会识别多个结构域。

单克隆抗体的优势

1. 制备后的杂交瘤成为恒定的再生源,所有批次相同;

2. 较低的背景染色情况;

3. 针对特定抗原有较高的特异性,更适合分析和测定;

4. 高度的同质性;

5. 单克隆抗体的特异性使其在混合物中高效结合抗原。

单克隆抗体的局限

1. 尽管可产生大量特异性抗体,但可能特异性过强;

2. 经化学处理后,单克隆抗体比多克隆抗体更易失去表位,使用不同单克隆抗体可以进行补偿。

抗体选择的考虑因素

在需要高特异性或长期一致性的应用中,特别是对于WB/IP/IF/ICC等实验时,推荐选择单克隆抗体。尽管多克隆抗体在灵敏度和检测低丰度蛋白时表现良好,但其特异性较差且易产生背景信号,适合用于不那么关键的检测。

抗原选择的策略

抗原可以是天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白及多肽。高质量的抗原将大大提高高质量抗体的制备率。在一般情况下,重组蛋白由于包含更多抗原决定簇,是优选抗原。选择抗原多肽时应遵循以下原则:

  • 尽量选择位于蛋白表面的区域;
  • 确保序列不形成α-螺旋;
  • N端和C端的肽段通常效果更佳;
  • 避免内部重复或近重复序列;
  • 避免同源性过强的肽段;
  • 交联应选择对产生抗体影响最小的一端;
  • 在序列中避免过多的脯氨酸(Pro),但适量存在有助于提升肽链的稳定性。

通过合理选择抗原及抗体类型,EVO视讯致力于为科研提供最优质的解决方案,助力生物医学领域的研究进展。

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